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发布时间:2019-06-27   点击次数:76次
   阴阳离子交换色谱柱的色谱行为
  磺酸基阳离子交换固定相是一种常见的阳离子交换固定相,离子交换功能基为苯磺酸,通常将其健合在有机聚合物基质(如苯乙烯-乙基乙烯苯)或硅胶基质上,前者耐酸碱,常用于离子色谱法分析无机阳离子,后者机械性强,常用于普通HPLC分析有机化合物阳离子。
  以硅胶为基质的磺酸基阳离子交换固定相简称为SCX,功能基团为大多为苯磺酸。目前市面上有多种品牌,pH适用范围一般为2~8,磺酸基均以离子型存在,为强阴阳离子交换色谱柱。本文主要探讨组分在SCX柱上的保留行为。
  基于疏水作用的色谱行为
  SCX固定相除磺酸基阳离子交换位点外,还有苯基这一疏水作用位点,其保留作用类似于苯基固定相,主要是疏水作用和与含双键组分的π-π相互作用。
  甲苯在SCX柱上的保留行为。甲苯作为一种电中性的强疏水性化合物,与固定相之间不存在离子交换作用,也不存在与极性磺酸基团间的亲水相互作用,甲苯的保留,可以视为与固定相上苯基相互作用的结果,其保留随着流动相中有机相比例增大而减小,也与疏水作用色谱原理吻合。
  对于疏水性强的阳离子化合物,该疏水作用会成为组分保留的一种重要的方式之一,有时这种作用甚至会强于离子交换作用。
  阴阳离子交换色谱柱既有聚合物基质色谱柱也有硅胶基质色谱柱。然而,不像在反相的领域硅胶柱占绝大部分占有率,离子交换模式中聚合物色谱柱和硅胶色谱柱使用频率相近。阴阳离子交换色谱柱在蛋白质,核酸等生物化学领域被广泛利用。绝大多数重组蛋白纯化都要用到离子交换。离子交换色谱的基础是高分辨率,可以直接放大规模应用在工业上,柱再生容易,还可以使蛋白浓缩。
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