福建快3走势图

技术文章
当前位置:福建快3走势图 > 技术文章 >
发布时间:2018-07-18   点击次数:322次
随着进样技术和色谱柱接头设计的改进,现在已经可以得到柱效每米在八万到十万的凝胶色谱填料。凝胶色谱填料合成技术的进展主要在下面四个方面:填料的微球化、窄粒度分布多孔硅微球的合成成功、小孔径多孔硅微球合成成功以及新的硅微球表面化学改性的发展。近年来在这方面有较多的新产品,中国也有许多单位在研制和生产。凝胶色谱正在迅速改变凝胶色谱的应用面。
(一)凝胶渗透色谱仪层析柱
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外,直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞,一般不超过1米。分族分离时用短柱,一般凝胶柱长20-30厘米,柱高与直径的比较5:1─10:1,凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。分级分离时柱高与直径之线为20:1─100:1,常用凝胶柱有50×25厘米,10×25厘米。层析柱滤板下的死体积应尽可能的小,如果支掌滤板下的死体积大,被分离组分之间重新混合的可能性就大,其结果是影响洗脱峰形,出现拖尾出象,降低分辩力。在分离时,死体积不能超过总床体积的1/1000。
(二)凝胶渗透色谱仪凝胶的选择
根据所需凝胶体积,估计所需干胶的量。一般葡聚糖凝胶吸水后的凝胶体积约为其吸水量的2倍,例如Sephadex G-20的吸水量为20,1 克Sephadex G─200吸水后形成的凝胶体积约40ml。凝胶的粒度也可影响层析分离效果。粒度细胞分离效果好,但阻力大,流速慢。一般实验室分离蛋白质采用100-200号筛目的的Sephadex G-200效果好,脱盐用Sephadex G-25、G-50,用粗粒,短柱,流速快。
(三)凝凝胶渗透色谱仪胶的制备
商品凝胶是干燥的颗粒使用前需直接在欲使用的洗脱液中膨胀。为了加速膨胀,可用加热法,即在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温至近沸,这样可大大中速膨胀,通常在1-2小时内即可完成。特别是在使用软胶时,自然膨胀需24小时至数天,而用加热法在几小时内就可完成。这种方法不但节约时间,而且还可消毒,除去凝胶中污染的细菌和排除胶内的空气。
(四)凝胶渗透色谱仪样品溶液的处理
样品溶液如有沉淀应过滤或离心除去,如含脂类可高速离心或通过Sephadex G-15短柱除去。样品的粘度不可大,含蛋白为超过4%,粘度高影响分离效果。上柱样品液的体积根据凝胶床体积的分离要求确定。分离蛋白质样品的体积为凝胶床的1-4%(一般约0.5-2ml),进行分族分离时样品液可为凝胶床的10%,在蛋白质溶液除盐时,样品可达凝胶床的20-30%。分级分离样品体积要小,使样品层尽可能窄,洗脱出的峰形较好。
东曹(上海)生物科技福建快3(www.youngjenn.com) 主营产品:离子色谱仪,凝胶渗透色谱仪
地址:上海市徐汇区虹梅路1801号A区凯科国际大厦1001室   GoogleSitemap

推荐收藏该企业网站
福建快3 福建快3 北京快乐8 福建快3走势图 秒速快3 秒速快3 福建快3 福建快3 福建快3 福建快3 秒速快3 福建快3开奖结果 北京快乐8 福建快3 福建快3