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探讨阴阳离子交换色谱柱的再生和修复技术
发布时间:2017-09-12   点击次数:498次
阴阳离子交换色谱柱在日常使用过程中,尽管保护严格,样品和流动相尽管经过前处理,但经过长时间的使用,仍然难以完全避免柱子受到污染,固定相流失、板结、柱床塌陷以及柱效下降等。有些可以通过维修,使部分柱效恢复。
柱污染再生技术
阴阳离子交换色谱柱污染后,可以用合适的溶剂冲洗,使柱效再生。C18柱常规的再生洗涤方法是:分别用甲醇、三氯甲烷、甲醇/水各60 mL依次通过色谱柱,再用100%甲醇60 mL平衡色谱柱后封存,柱效将恢复正常。必要时,根据柱污染性质(如有机污染、盐类污染等),采用0.05 mol/L H2SO4、0.5 mol/L H3PO4或0.1 mol/L EDTA钠盐冲洗,然后再用水冲洗,zui后用100%甲醇平衡色谱柱后封存。对于严重污染的C18柱,可采用水、甲醇、氯仿、乙烷依次冲洗后,按顺序倒过来再冲洗1次,每次所用溶剂60 mL,不接检测器,zui后用100%甲醇平衡色谱柱封存。
柱污染的修复
阴阳离子交换色谱柱污染再生无效或已知柱污染严重时,可以采用柱修补的方法解决,但柱污染深度不宜超过5 mm。方法是将特制小铲将污染部分挖去,再用与柱填料相同的固定相与流动相混合制成浆状,然后将浆状固定相仔细补入被挖去的部分(尽量使后填补的固定相接近原装的紧密程度),修平端面即可。修好的柱子如果柱头两端的筛板的孔径是一致的,可将柱子颠倒过来使用一般时间,目的是借助流动相冲洗作用,恢复柱床紧密程度。
柱塌陷的修复
阴阳离子交换色谱柱塌陷的原因很多。对于塌陷不太严重时,如果柱头两端的筛板孔径是一致的,可将柱颠倒使用一般时间,即可恢复性能。当塌陷严重(5 mm左右)时,可采用柱污染的修复方法修补即可。
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